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B10細胞與重癥肌無力臨床及美羅華治療反應關系的研究

B10細胞與重癥肌無力臨床及美羅華治療反應關系的研究

作者:師大云端圖書館 時間:2015-07-13 分類:開題報告 喜歡:5743
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【摘要】目的:美羅華即利妥昔單抗(rituximab)的治療是針對CD20抗原產生作用,并有效地耗竭表達CD20的B細胞前體和成熟的B細胞。當這些B細胞被清除后,B細胞可以再生。應用美羅華治療難治性重癥肌無力MG(myastheniagravis,MG)方法可以為我們在MG患者中觀察B10細胞亞群提供了一個機會,我們研究MG患者的臨床嚴重程度和狀態用美國重癥肌無力協會制定的標準即MGFA(MyastheniaGravisAssociationofAmericanScores,MGFA)進行評定,確定患者血液單核淋巴細胞中分泌IL-10的B細胞出現的頻率,并進一步研究B10細胞在MG患者的動力學變化,同時與健康對照者相比較。確定重癥肌無力患者分泌IL-10的B細胞即是B10細胞亞群的特征,發現B10細胞在重癥肌無力患者體內變化的特點,它與疾病嚴重程度的相關性,并且確定這種細胞在患者接受美羅華治療前后的變化特點,進一步與健康對照者進行比較。從而確定這類B10細胞在MG患者中的特征表現,并評價其與疾病活躍程度及美羅華治療前后的B10細胞的消耗程度,為的是尋找一個在MG患者中與疾病活躍程度和對免疫治療反應的標記。研究B細胞特別是B10細胞在自主免疫疾病特別是重癥肌無力的診斷、疾病狀態的觀察與免疫治療效果等方面的變化特點,從而為MG的診斷、治療、疾病控制程度等領域的理論和實踐開辟了新的途徑。方法:48例符合研究條件的MG患者被納入研究,外周血的單核細胞(PeripheralBloodMononuclearCells,PBMCS)從MG患者及健康對照組患者外周血中分離出來,其中有22例MG患者對傳統的治療效果反應差而成為難治性MG患者,對這22例難治性的MG患者給予正規的持續1.5年的美羅華治療。確定為難治性重癥肌無力的標準是指患者繼往至少使用兩種免疫抑制劑,并且其中一種是糖皮質激素,或至少在繼往使用的免疫抑制劑中有一種是強的松,但是治療效果不滿意。每個患者接受四次美羅華的靜脈注射治療,每周一次,每次劑量是375mg/m2。分別在試驗開始時、3-4個月、8-9個月和15-16個月四個點抽取患者外周血同時獲取健康對照組的外周血,并用流式細胞技術(FACS)將表面帶有CD19,CD1d,CD5,CD24,CD38的抗原和分泌IL-10的B細胞亞群分選出來,監測不同臨床亞型MG患者和接受美羅華治療的MG患者體內這些B細胞的表達水平和變化特點。并且與健康對照組進行比較。結果:與健康人群對比發現CD19+的分泌IL-10的B細胞數量在MG患者中減低,這種分泌IL-10的B細胞多數共同表達CD5和CD1d或CD24和CD38,而在重癥肌無力患者中按MGFA評價后得分高的患者產IL-10的B細胞的數量減低。與健康對照組相比,MG患者體內的B10細胞多數表達CD5和CD1d或是CD24和CD38。MG患者血中B10細胞的含量越低;患者的MGFA分數越高,B10細胞亞群在重癥肌無力患者血液中的水平減低越明顯。進一步顯示對美羅華反應良好的重癥肌無力患者顯示出快速B細胞特別是B10細胞的再生能力,而對美羅華治療反應不良的重癥肌無力患者,其B10細胞的再生速度延遲。我們觀察到MG患者對美羅華治療反應良好者顯示B細胞能夠針對治療快速反應分泌IL-10而對反應不佳者,B細胞反應延遲。結論:重癥肌無力患者血液單核細胞中的B10細胞與疾病的進程和階段發展有相關性,并且B10細胞的動力學變化與美羅華治療重癥肌無力的反應相關。我們認為能夠分泌IL-10的CD5+CDld+CD24+CD38+B的B細胞亞群可以作為MG患者疾病活躍程度和針對免疫治療反應的一個標志。我們的研究證實B細胞中一個特殊亞群CD5+CDld+CD24+CD38+B細胞合成分泌IL-10,可以作為重癥肌無力患者的對免疫治療反應的一個指標,也可以作為疾病活躍程度的一個指標,我們的工作為研究B細胞的自主免疫疾病領域的理論和實踐開辟了新的途徑。
【作者】孫峰;
【導師】施福東;郝峻巍;
【作者基本信息】天津醫科大學,神經病學,2014,博士
【關鍵詞】白介素-10;B細胞;重癥肌無力;美羅華;流式細胞術;

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